Выявление Ehrlichia spp. и Theileria spp. в клещах Hyalomma anatolicum, собранных в Таджикистане

Исследовано наличие генетического материала Rickettsiaspp., Ehrlichiaspp., Anaplasmaspp., Babesiaspp. и Theileriaspp. в клещах Hyalommaanatolicum, собранных в юго-западной части Таджикистана, с последующим секвенированием и филогенетическим анализом фрагментов 16S рРНК гена и groESL оперона для Ehrlichiaspp. и фрагмента гена 18S рРНК для Theileriaspp., обнаруженного в изученных клещах. Клещи H. anatolicum были собраны в районах Турсунзаде и Рудаки и исследованы с использованием специфичных праймеров c помощью ПЦР на наличие генетического материала Rickettsiaspp., Ehrlichiaspp., Anaplasmaspp., Babesiaspp. и Theileriaspp. Выделенные ПЦР-фрагменты генов 16S рРНК, groESL оперона и 18S рРНК были секвенированы и проведен их филогенетический анализ с целью генотипирования обнаруженных изо-лятов клещевых патогенов. В клещах, собранных в районе Рудаки, обнаружена ДНК Ehrlichiaspp. (3.3 %) и Theileriaspp. (3.3 %), а в Турсунзаде - ДНК Ehrlichiaspp. (0.7 %). Секвенирование фрагментов гена 16S рРНК и groESL оперона Ehrlichiaspp. показало высокий уровень гомологии нуклеотидной последовательности с известными последовательностями Ehrlichiaspp. Таджикские изоляты Theileriaspp. были генотипированы как Theileriaannulata на основе анализа последовательности гена 18S рРНК. Филогенетический анализ показал, что таджикские изоляты Ehrlichiaspp. очень близки с изолятами Ehrlichiaspp., циркулирующими в Китае и Бразилии. Изолят Tajikistan-5 кластеризуется с предполагаемым новым видом Ehrlichiamineirensis. Таджикские изоляты Theileriaspp. были генетически схожи с вариантами T. annulata, циркулирующими в Турции, Иране, Пакистане и Китае.

1. Aguiar D.M., Ziliani T.F., Zhang X., Melo A.L., Braga I.A., Witter R. A novel Ehrlichia genotype strain distinguished by the TRP36 gene naturally infects cattle in Brazil and causes clinical manifestations associated with ehrlichiosis. Ticks Tick Borne Dis. 2014;5(5):537-544. DOI 10.1016/j.ttbdis.2014.03.010.

2. Begum F., Wisseman C.J., Casals J. Tick-borne viruses of West Pakistan: IV. Viruses similar to or identical with, Crimean hemorrhagic fever (Congo-Semunya), Wad Medani and Pak Argas 461 isolated from ticks of the Changa Manga Forest, Lahore District, and of Hunza, Gilgit Agency, W. Pakistan. Am. J. Epidemiol. 1970;92(3): 197-202.

3. Cabezas-Cruz A., Valdes J.J., de la Fuente J. The glycoprotein TRP36 of Ehrlichia sp. UFMG-EV and related cattle pathogen Ehrlichia sp. UFMT-BV evolved from a highly variable clade of E. canis under adaptive diversifying selection. Parasit. Vectors. 2014;7:584. DOI 10.1186/s13071-014-0584-5.

4. Cruz A.C., Zweygarth E., Ribeiro M.F., da Silveira J.A., de la Fuente J., Grubhoffer L., Valdes J.J., Passos L.M. New species of Ehrlichia isolated from Rhipicephalus (Boophilus) microplus shows an ortholog of the E. canis major immunogenic glycoprotein gp36 with a new sequence of tandem repeats. Parasit. Vectors. 2012;11(5):291. DOI 10.1186/1756-3305-5-291.

5. Gajadhar A.A., Lobanov V., Scandrett W.B., Campbell J., Al-Adhami B. A novel Ehrlichia genotype detected in naturally infected cattle in North America. Vet. Parasitol. 2010;173(3-4):324-329. DOI 10.1016/j.vetpar.2010.06.034.

6. Gresikova M., Sekeyova M., Tempera G., Guglielmino S., Castro A. Identification of a Sindbis virus strain isolated from Hyaloma marginatum ticks in Sicily. Acta Virol. 1978;22(3):231-232.

7. Parola P., Inokuma H., Camicas J.L., Brouqui P., Raoult D. Detection and identification of spotted fever group Rickettsiae and Ehrlichiae in African ticks. Emerg. Infect. Dis. 2001;7(6):1014-1017. DOI 10.3201/eid0706.010616.

8. Petrova I.D., Kononova Iu.V., Chausov E.V., Shestopalov A.M., Tishkova F.Kh. Genetic variants of the Crimean-Congo hemorrhagic fever virus circulating in endemic areas of Southern Tajikistan in 2009. Molecular Genetics, Microbiology, and Virology. 2013;(3):29-36. DOI 10.3103/S0891416813030063.

9. Rar V.A., Livanova N.N., Panov V.V., Doroschenko E.K., Pukhov-skaya N.M., Vysochina N.P., Ivanov L.I. Genetic diversity of Ana-plasma and Ehrlichia in the Asian part of Russia. Ticks Tick Borne Dis. 2010;1(1):57-65. DOI 10.1016/j.ttbdis.2010.01.002.

10. Rar V.A., Maksimova T.G., Zakharenko L.P., Bolykhina S.A., Dobrotvorsky A.K., Morozova O.V. Babesia DNA detection in canine blood and Dermacentor reticulatus ticks in southwestern Siberia, Russia. Vector-Borne Zoonotic Dis. 2005;5(3):285-287. DOI 10.1089/vbz.2005.5.285.

11. Rasulov I. Ticks status in Central Asia with a special emphasis on Uzbekistan. Parasitol. Res. 2007;101(Suppl.2):183-186.

12. Robinson P.M. Theileriosis annulata and its transmission - a review. Trop. Anim. Health Prod. 1982;14(1):3-12.

13. Roux V., Rydkina E., Eremeeva M., Raoult D. Citrate synthase gene comparison, a new tool for phylogenetic analysis, and its application for the Rickettsiae. Int. J. Syst. Bacteriol. 1997;47(2):252-261. DOI 10.1099/00207713-47-2-252.

14. Sumner J.W., Nicholson W.L., Massung R.F. PCR amplification and comparison of nucleotide sequences from the groESL heat shock operon of Ehrlichia species. J. Clin. Microbiol. 1997;35(8):2087-2092.

15. Tamura K., Peterson D., Peterson N., Stecher G., Nei M., Kumar S. MEGA5: Molecular Evolutionary Genetics Analysis using maximum likelihood, evolutionary distance, and maximum parsimony methods. Mol. Biol. Evol. 2011;28(10):2731-2739. DOI 10.1093/molbev/msr121.

16. Tishkova F.H., Belobrova E.A., Valikhodzhaeva M., Atkinson B., Hewson R., Mullojonova M. Crimean-Congo hemorrhagic fever in Tajikistan. Vector-Borne Zoonotic Dis. 2012;12(9):722-726. DOI 10.1089/vbz.2011.0769.

17. Wen B., Jian R., Zhang Y., Chen R. Simultaneous detection of Anaplasma marginale and a new Ehrlichia species closely related to Ehrlichia chaffeensis by sequence analyses of 16S ribosomal DNA in Boophilus microplus ticks from Tibet. J. Clin. Microbiol. 2002; 40(9):3286-3290. DOI 10.1128/jcm.40.9.3286-3290.2002.

18. Wu X.B., Na R.H., Wei S.S., Zhu J.S., Peng H.J. Distribution of tick-borne diseases in China. Parasit. Vectors. 2013;6:119. DOI 10.1186/1756-3305-6-119.