Новый подход к анализу эволюции SARS-CoV-2, основанный на визуализации и кластеризации больших объемов генетических данных, компактно представленных в оперативной памяти

Коронавирус SARS-CoV-2 – это вирус, для которого было собрано, секвенировано и сохранено ре­кордное количество вариантов генома из источников по всему миру. Нуклеотидные последовательности в фор­мате FASTA включают 16.8 млн геномов, каждый длиной ≈29 900 нт (нуклеотидов), общим размером ≈500 ∙ 10⁹ нт, или 466 Гб. Мы предлагаем способ представления данных, позволяющий разместить без потерь всю эту информацию в оперативной памяти (RAM) обычного персонального компьютера. Более того, будет достаточно всего ≈330 Мб. Выравнивание их всех относительно исходной референсной последовательности Wunah-Hu-1 позволяет представить каждый геном как структуру данных, содержащую списки точечных мутаций, делеций и вставок. Наша реализация такого представления данных привела к коэффициенту сжатия 1:1500 (для сравнения, упаковка данных с помощью популярного архиватора WinRAR дает степень сжатия только 1:62) и обеспечила возможность быстрого вычисления редакционного расстояния между различными вариантами генома. С помощью этого подхода, реализованного в виде программы на C++, мы провели анализ различных свойств набора геномов SARS-CoV-2, содержащихся в NCBI Genbank, собранных за 4.5 года (с 24.12.2019 по 24.06.2024). Были рассчитаны распределение числа геномов от числа неопределенных нуклеотидов “N” в них, число уникальных геномов и кластеров из идентичных геномов, а также распределение кластеров по размеру (числу идентичных геномов) и продолжительности (длине временного интервала между первым и последним геномом каждого кластера). Наконец, эволюция распределений числа изменений (редакционное расстояние между каждым ге­номом и референсной последовательностью), вызванных заменами, делециями и вставками, была визуализи­рована в виде 3D поверхностей, наглядно изображающих процесс вирусной эволюции в течение 4.5 лет, с ин­тервалом в одну неделю. Такая визуализация хорошо соотносится с филогенетическими деревьями (обычно рассчитываемыми по 3–4 тыс. представителей вариантов генома), но строится на основе миллионов геномов, отображает больше деталей и не зависит от типа классификации линий/клад.

1. Aksamentov I., Roemer C., Hodcroft B., Neher R.A. Nextclade: clade assignment, mutation calling and quality control for viral genomes. J. Open Source Software. 2021;6(67):3773. doi 10.21105/joss.03773

2. Amicone M., Borges V., Alves M.J., Isidro J., Zé-Zé L., Duarte S., Vieira L., Guiomar R., Gomes J.P., Gordo I. Mutation rate of SARSCoV-2 and emergence of mutators during experimental evolution. Evol. Med. Public Health. 2022;10(1):142-155. doi 10.1093/emph/eoac010

3. Bai C., Zhong Q., Gao G.F. Overview of SARS-CoV-2 genome-encoded proteins. Sci. China Life Sci. 2022;65(2):280-294. doi 10.1007/s11427-021-1964-4

4. Bolze A., Basler T., White S., Rossi A.D., Wyman D., Dai H., Roychoudhury P., Greninger A.L., Hayashibara K., Beatty M., Shah S., Stous S., McCrone J.T., Kil E., Cassens T., Tsan K., Nguyen J., Ramirez J., Carter S., Cirulli E.T., Barrett K.S., Washington N.L., Belda-Ferre P., Jacobs S., Sandoval E., Becker D., Lu J.T., Isaksson M., Lee W., Luo S. Evidence for SARS-CoV-2 Delta and Omicron co-infections and recombination. Med. 2022;3(12):848-859. doi 10.1016/j.medj.2022.10.002

5. Campagnola G., Govindarajan V., Pelletier A., Canard B., Peersen O.B. The SARS-CoV-2 nsp12 polymerase active site is tuned for largegenome replication. J. Virol. 2022;96(16):e0067122. doi 10.1128/jvi.00671-22

6. Cui X., Wang Y., Zhai J., Xue M., Zheng C., Yu L. Future trajectory of SARS-CoV-2: Constant spillover back and forth between humans and animals. Virus Res. 2023;328:199075. doi 10.1016/j.virusres.2023.199075

7. Palyanov A.Yu., Palyanova N.V. On the space of SARS-CoV-2 genetic sequence variants. Vavilovskii Zhurnal Genetiki i Selektsii = Vavilov Journal of Genetics and Breeding. 2023;27(7):839-850. doi 10.18699/VJGB-23-97

8. Palyanova N.V., Sobolev I.A., Alekseev A., Glushenko A., Kazachkova E., Markhaev A., Kononova Y., Gulyaeva M., Adamenko L., Kurskaya O., Bi Y., Xin Y., Sharshov K., Shestopalov A. Genomic and epidemiological features of COVID-19 in the Novosibirsk region during the beginning of the pandemic. Viruses. 2022;14(9):2036. doi 10.3390/v14092036

9. Palyanova N.V., Sobolev I.A., Palyanov A.Yu., Kurskaya O.G., Komissarov A.B., Danilenko D.M., Fadeev A.V., Shestopalov A.M. The development of the SARS-CoV-2 epidemic in different regions of Siberia in the 2020–2022 period. Viruses. 2023;15(10):2014. doi 10.3390/v15102014

10. Sanjuán R., Domingo-Calap P. Mechanisms of viral mutation. Cell. Mol. Life Sci. 2016;73(23):4433-4448. doi 10.1007/s00018-016-2299-6

11. Simon-Loriere E., Holmes E.C. Why do RNA viruses recombine? Nat. Rev. Microbiol. 2011;9(8):617-626. doi 10.1038/nrmicro2614

12. Sonnleitner S.T., Prelog M., Sonnleitner S., Hinterbichler E., Halbfurter H., Kopecky D.B.C., Almanzar G., Koblmüller S., Sturmbauer C., Feist L., Horres R., Posch W., Walde G. Cumulative SARS-CoV-2 mutations and corresponding changes in immunity in an immunocompromised patient indicate viral evolution within the host. Nat. Commun. 2022;13(1):2560. doi 10.1038/s41467-022-30163-4

13. Temmam S., Vongphayloth K., Baquero E., Munier S., Bonomi M., Regnault B., Douangboubpha B., Karami Y., Chrétien D., Sanamxay D., Xayaphet V., Paphaphanh P., Lacoste V., Somlor S., Lakeomany K., Phommavanh N., Pérot P., Dehan O., Amara F., Donati F., Bigot T., Nilges M., Rey F.A., van der Werf S., Brey P.T., Eloit M. Bat coronaviruses related to SARS-CoV-2 and infectious for human cells. Nature. 2022;604(7905):330-336. doi 10.1038/s41586-022-04532-4

14. Wu F., Zhao S., Yu B., Chen Y.M., Wang W., Song Z.-G., Hu Y., Tao Z.-W., Tian J.-H., Pei Y.-Y., Yuan M.-L., Zhang Y.-L., Dai F.-H., Liu Y., Wang Q.-M., Zheng J.-J., Xu L., Holmes E.C., Zhang Y.-Z. A new coronavirus associated with human respiratory disease in China. Nature. 2020;579(7798):265-269. doi 10.1038/s41586-020-2008-3

15. Zhou P., Yang X.L., Wang X.G., Hu B., Zhang L., Zhang W., Si H.-R., Zhu Y., Li B., Huang C.-L., Chen H.-D., Chen J., Luo Y., Guo H., Jiang R.-D., Liu M.-Q., Chen Y., Shen X.-R., Wang X., Zheng X.-S., Zhao K., Chen Q.-J., Deng F., Liu L.-L., Shi Z.-L. A pneumonia outbreak associated with a new coronavirus of probable bat origin. Nature. 2020;579(7798):270-273. doi 10.1038/s41586-020-2012-7